无菌包装常见的灭菌方式有几种，而蒸汽灭菌（即湿热灭菌）是最常见的非工业基础灭菌方式。在灭菌过程中，包装被放置在一个充满蒸汽和适度压力的密闭环境中，环境的温度一般控制在121-132摄氏度之内。这个过程跟辐射灭菌有点相似，但是不同的是这种方式利用的是高温蒸汽，需要无菌包装的材料必须是多孔的，且允许蒸汽自由通过。这种灭菌方式最常用的包装材料通常是Tyvek特卫强盖材和吸塑盒结合。

当使用蒸汽灭菌时，一个需要重点考虑的事项就是评估湿热与用于将盖材和吸塑盒粘合的粘合剂之间的相互作用，如果粘合剂不是耐高温和潮湿的，那么无菌包装的无菌屏障系统可能就会受到损害。

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